當(dāng)普通的ODS色譜柱在100%的水相流動相中使用時,由于水相和填料表面的疏水基團相互排斥作用,ODS色譜柱的疏水性明顯減低,使餾出物的保留減低。如上圖例中,色譜柱在100%水相流動相中停留并過夜,比較 在過夜前和過夜后對核酸堿基分析的保留時間,腺嘌呤在過夜后分析的保留時間,其它產(chǎn)品(Brand Ⅱ)顯示為在原來基礎(chǔ)上降低89%,其它產(chǎn)品(Brand Ⅲ)顯示為在原來基礎(chǔ)上降低71%,而Hydrosphere C18的保留時間則可達到98%。Hydrosphere C18色譜填料設(shè)計為顆粒表面保留一定的親水性,所以可實現(xiàn)水合作用。當(dāng)Hydrosphere C18色譜柱用在含非有機溶劑流動相時,其保留時間不一定能夠有效的縮短,但是,其色譜分離的結(jié)果可達到非常高的再現(xiàn)性。
上圖顯示了采用不同的色譜柱分離含有不同特性的混合樣品的分離狀況比較,Hydrosphere C18色譜柱與Pro C18色譜柱相比,具有更高的親水性和低的密度,其結(jié)果是縮短了疏水化合物的保留時間,包括n-丙苯和n-丁苯,以及如雙相化合物苊;而與此相反,具有大量氫基鍵合相特性的睪丸激素在Hydrosphere C18色譜柱與同樣具有高親水性表面的其它產(chǎn)品(Brand Ⅳ)相比,其保留時間更長。
堿性化合物阿米替林在其它產(chǎn)品(Brand Ⅳ和Brand Ⅴ)上,色譜峰會產(chǎn)生拖尾;而在Hydrosphere C18和Pro C18色譜柱上,即可獲得良好的色譜分離;盡管阿米替林在Hydrosphere C18和Pro C18色譜柱上的保留時間相近,但是在這兩種色譜柱上的最大不同是n-丁苯和阿米替林的分辨率不同,這是由于Hydrosphere C18填料表面的疏水性所致。
由此顯示了Hydrosphere C18色譜柱與常規(guī)多用途的ODS色譜柱有著不同的分離特性,所以Hydrosphere C18色譜柱常用于分離在普通ODS不能很好分離的化合物。